附件：病原體特異性M型免疫球蛋白定性檢測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2013年第3號(hào)）.doc

病原體特異性M型免疫球蛋白定性檢測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則
（2013年第3號(hào)）

一、前言

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)病原體特異性M型免疫球蛋白（Immunoglobulin M，IgM）定性檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫(xiě)，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門(mén)對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的技術(shù)審評(píng)提供參考。

本指導(dǎo)原則是對(duì)病原體特異性IgM抗體定性檢測(cè)試劑的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是對(duì)申請(qǐng)人和審查人員的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊(cè)審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿(mǎn)足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

二、適用范圍

病原體特異性IgM抗體定性檢測(cè)試劑是指利用酶聯(lián)免疫吸附法、化學(xué)發(fā)光法或磁微粒酶免疫技術(shù)等基于抗原抗體反應(yīng)原理，以特定病原體的特異性IgM抗體為檢測(cè)目標(biāo)，對(duì)人血清或血漿樣本中病原體特異性IgM抗體進(jìn)行體外定性檢測(cè)的試劑。本指導(dǎo)原則適用于進(jìn)行首次注冊(cè)申報(bào)和相關(guān)許可事項(xiàng)變更的產(chǎn)品。

根據(jù)結(jié)構(gòu)不同，人免疫球蛋白可分為G型免疫球蛋白（IgG）、M型免疫球蛋白（IgM）、A型免疫球蛋白（IgA）、E型免疫球蛋白（IgE）和D型免疫球蛋白（IgD）5種類(lèi)型， IgM占血清免疫球蛋白總量的5%～10%。分泌型IgM為五聚體，是分子量最大的免疫球蛋白分子，一般不能通過(guò)血管壁，主要存在于血液中。五聚體IgM含10個(gè)抗原結(jié)合片段（Fab段），有很強(qiáng)的抗原結(jié)合能力，含5個(gè)可結(jié)晶化片段（Fc段），比G型免疫球蛋白（IgG）更易激活補(bǔ)體，IgM抗體一般為保護(hù)性抗體，具有免疫性。IgM是個(gè)體發(fā)育過(guò)程中最早合成和分泌的抗體，在胚胎發(fā)育晚期的胎兒即能產(chǎn)生IgM，且由于IgM分子量大，不能通過(guò)母血進(jìn)入胎兒體內(nèi)，故臍帶血或新生兒血液中特異性IgM升高常提示胎兒或新生兒存在宮內(nèi)或圍生期感染。在病原體感染的初次體液免疫應(yīng)答中（原發(fā)性感染），特異性IgM抗體首先出現(xiàn)，但其普遍反應(yīng)短暫，一般幾周后即不易再測(cè)到。病原體特異性IgM抗體陽(yáng)性常提示早期感染，可用于感染急性期的輔助判斷。人血液樣本中病原體特異性IgM抗體的定性檢測(cè)，對(duì)某些傳染病如甲型肝炎、乙型肝炎、TORCH（弓形蟲(chóng)、風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒及單純皰疹病毒）類(lèi)病原體感染等有較高的臨床參考價(jià)值。不具備病原體分離培養(yǎng)鑒定實(shí)驗(yàn)室的臨床檢測(cè)機(jī)構(gòu)常將病原體特異性IgM抗體的檢測(cè)作為早期感染的唯一依據(jù)，因此，病原體特異性IgM抗體檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性顯得頗為重要。假陽(yáng)性結(jié)果可能導(dǎo)致病人接受不必要的抗病原體治療而假陰性結(jié)果則有可能造成患者治療的延誤，由特異性IgM抗體檢測(cè)造成的誤診或漏診對(duì)孕婦或胎兒可能造成很大傷害。相關(guān)生產(chǎn)企業(yè)必須充分意識(shí)到該類(lèi)產(chǎn)品的潛在風(fēng)險(xiǎn)，根據(jù)本指導(dǎo)原則的要求對(duì)該類(lèi)試劑的安全性和有效性進(jìn)行科學(xué)合理的驗(yàn)證。

三、基本要求

（一）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品臨床適用癥背景情況、預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性的說(shuō)明、研究結(jié)果的總結(jié)評(píng)價(jià)以及同類(lèi)產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，其中同類(lèi)產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)及臨床適用范圍等方面寫(xiě)明擬申報(bào)產(chǎn)品與目前市場(chǎng)上已獲批準(zhǔn)的同類(lèi)產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。綜述資料注冊(cè)申報(bào)資料的重要組分之一，其內(nèi)容應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）》（國(guó)食藥監(jiān)械〔2007〕229號(hào)）和《體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料基本要求》（國(guó)食藥監(jiān)械〔2007〕609號(hào)）的相關(guān)要求。另外，建議申請(qǐng)人對(duì)以下幾方面內(nèi)容進(jìn)行著重介紹：

1.特定病原體的生物學(xué)特性、結(jié)構(gòu)與功能、感染過(guò)程、潛伏期、特異性IgM抗體產(chǎn)生及可持續(xù)存在時(shí)間、病理背景等。

2.特定病原體感染相關(guān)的疾病情況、流行病學(xué)以及易患（高危）人群的說(shuō)明。

3.對(duì)申報(bào)試劑檢測(cè)結(jié)果可能帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行合理評(píng)估，即由申報(bào)試劑的假陽(yáng)性/假陰性結(jié)果導(dǎo)致的對(duì)患者臨床診治、孕婦或胎兒的不恰當(dāng)處理、疫苗接種、流行病學(xué)等方面的負(fù)面影響。

4.用于特定病原體特異性IgM抗體檢測(cè)方法的發(fā)展歷程摘要及各種檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn)評(píng)價(jià)。

（二）產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

說(shuō)明書(shū)承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、標(biāo)本采集及處理、實(shí)驗(yàn)方法、檢測(cè)結(jié)果解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)是體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)最重要的文件之一。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導(dǎo)原則》（國(guó)食藥監(jiān)械〔2007〕240號(hào)）的要求，境外試劑的中文說(shuō)明書(shū)除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說(shuō)明書(shū)的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請(qǐng)人提交的注冊(cè)申報(bào)資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對(duì)此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)注明文獻(xiàn)的相關(guān)信息。

結(jié)合《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導(dǎo)原則》（國(guó)食藥監(jiān)械〔2007〕240號(hào)）的要求，下面對(duì)病原體特異性IgM抗體定性檢測(cè)試劑說(shuō)明書(shū)的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，以指導(dǎo)注冊(cè)申報(bào)人員更合理地完成說(shuō)明書(shū)編制。

1.【預(yù)期用途】 應(yīng)至少包括以下幾部分內(nèi)容：

（1）試劑盒用于體外定性檢測(cè)人血清和/或血漿樣本中xx的特異性IgM抗體。

（2）簡(jiǎn)單介紹待測(cè)目標(biāo)的特征，如特定病原體的生物學(xué)性狀、潛伏期、易感人群、感染后的臨床表現(xiàn)等臨床背景相關(guān)的信息介紹;適用于對(duì)哪些患者人群的檢測(cè)，如具有何種癥狀/體征的患者、相關(guān)的密切接觸者、地域要求或年齡限制（如有）等。

（3）病原體特異性IgM抗體的產(chǎn)生、持續(xù)時(shí)間、與特異性IgG、病原體核酸等其他檢測(cè)指標(biāo)的關(guān)聯(lián);

（4）該試劑盒的應(yīng)用是否需要配套使用的專(zhuān)用儀器，與靶抗體檢測(cè)相關(guān)的其他檢測(cè)技術(shù)的介紹。

2.【主要組成成分】

（1）說(shuō)明試劑盒包含組分的名稱(chēng)、數(shù)量、比例或濃度等信息，陰性/陽(yáng)性對(duì)照品可能含有人源組分，應(yīng)提供其生物學(xué)來(lái)源、滅活方法及無(wú)傳染性確認(rèn)的方法等。

（2）對(duì)檢測(cè)中使用的抗原及抗體的信息進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹。

（3）試劑盒中不包含但對(duì)該項(xiàng)檢測(cè)必須的組分，企業(yè)應(yīng)列出相關(guān)試劑/耗材的名稱(chēng)、貨號(hào)及其他相關(guān)信息。

3.【儲(chǔ)存條件及有效期】

對(duì)試劑盒的效期穩(wěn)定性、開(kāi)封穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性等信息做詳細(xì)介紹。

膠體金試紙條產(chǎn)品應(yīng)對(duì)開(kāi)封后未使用產(chǎn)品允許暴露于空氣中的溫度、濕度及期限等條件予以明確。

4.【樣本要求】 重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：

（1）樣本采集前對(duì)患者的要求：如采集時(shí)間、采集順序等，是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。

（2）樣本采集：說(shuō)明采集方法及樣本類(lèi)型，如有血漿樣本，應(yīng)注明對(duì)抗凝劑的要求。

（3）樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件及期限（短期、長(zhǎng)期）、運(yùn)輸條件等。冷藏/冷凍樣本檢測(cè)前是否須恢復(fù)室溫，凍融次數(shù)。經(jīng)熱處理樣本是否可用、對(duì)儲(chǔ)存樣本的添加劑要求等。

（4）如果檢測(cè)系統(tǒng)含有某種IgG抗體的去除技術(shù)（IgG吸附劑），如抗人IgG抗體等，則應(yīng)包括IgG吸附劑使用相關(guān)的注意事項(xiàng)。例如：經(jīng)IgG吸附劑處理的樣本不能用于IgG類(lèi)抗體的檢測(cè);在檢測(cè)IgM類(lèi)抗體的同時(shí)，檢測(cè)處理過(guò)的混合物中的IgG類(lèi)抗體，以證實(shí)對(duì)IgG、類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）等去除的有效性等。

5.【檢驗(yàn)方法】 詳細(xì)說(shuō)明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟：

（1）實(shí)驗(yàn)環(huán)境：溫、濕度條件，檢測(cè)試劑及樣本的復(fù)溫要求及相關(guān)注意事項(xiàng)。例如：凍存樣本在復(fù)融后應(yīng)經(jīng)過(guò)充分的混勻再行檢測(cè)。

（2）試劑配制方法、注意事項(xiàng)，試劑開(kāi)封后使用方法及注意事項(xiàng)等。

（3）試驗(yàn)條件：操作步驟、溫度、時(shí)間、儀器波長(zhǎng)等以及試驗(yàn)過(guò)程中的注意事項(xiàng)。不同型號(hào)產(chǎn)品，加樣方法如有差異，建議分別以圖示方式描述清楚。

6.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

結(jié)果判斷或計(jì)算：詳細(xì)描述對(duì)檢測(cè)結(jié)果的判定或計(jì)算方法、對(duì)質(zhì)控品（對(duì)照品）的檢測(cè)結(jié)果要求（試驗(yàn)有效性的判斷）等。如果質(zhì)控品和病人樣本的使用方法不同，生產(chǎn)商應(yīng)注明必要的指導(dǎo)和解釋。建議在質(zhì)控品（對(duì)照品）結(jié)果解釋環(huán)節(jié)注明以下字樣：“如果質(zhì)控結(jié)果與預(yù)期不符，實(shí)驗(yàn)室不應(yīng)出具檢測(cè)報(bào)告?！?/p>

7.【檢驗(yàn)方法局限性】

綜合產(chǎn)品的預(yù)期用途、臨床背景、檢測(cè)方法及適用范圍等信息，對(duì)可能出現(xiàn)的局限性進(jìn)行相關(guān)說(shuō)明，主要包括以下描述，請(qǐng)申請(qǐng)人選擇適用的條款在產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中予以闡述。

（1）本產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，不應(yīng)作為臨床診治的唯一依據(jù)，對(duì)患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查（尤其是病原學(xué)檢測(cè)）、治療反應(yīng)及流行病學(xué)等信息綜合考慮。

（2）感染初期，病原體特異性IgM抗體未產(chǎn)生或滴度很低會(huì)導(dǎo)致陰性結(jié)果，如懷疑有病原體感染，應(yīng)提示患者在7-14天內(nèi)復(fù)查，抽取第二份樣本，并和第一份樣本在同條件下同時(shí)檢測(cè)，以確定是否有初次感染的血清轉(zhuǎn)化或病原體特異IgM或IgG抗體滴度明顯升高。

（3）高滴度病原體特異性IgG抗體會(huì)與特異性IgM抗體競(jìng)爭(zhēng)抗原結(jié)合部位，會(huì)使檢測(cè)的敏感性降低，IgM結(jié)果可能會(huì)出現(xiàn)假性低值或陰性結(jié)果。尤其是懷疑先天性病原體感染的新生兒樣本，他們的血清中可能含有母親來(lái)源的高水平病原體特異的IgG抗體和胎兒產(chǎn)生的相對(duì)低水平的病原體特異IgM抗體，因此，對(duì)于該類(lèi)樣本的陰性結(jié)果應(yīng)慎重分析。

（4）由于臍帶血中可能含有源于母體的病原體特異性IgM抗體（胎盤(pán)滲漏），因此，最好在出生后5天內(nèi)再對(duì)嬰兒的后續(xù)樣本進(jìn)行檢測(cè)，以證實(shí)臍帶血樣本病原體特異性IgM抗體的陽(yáng)性結(jié)果。建議將新生兒與母親的血清樣本平行進(jìn)行測(cè)試，如果是胎兒的先天性感染，其IgM抗體水平（以及IgG抗體水平）會(huì)持續(xù)存在或呈上升趨勢(shì)， 反之，如果抗體來(lái)源于母體，則在在平行實(shí)驗(yàn)中嬰兒的抗體水平會(huì)逐漸下降或消失。

（5）由于孕婦的實(shí)驗(yàn)室檢查不能可靠地鑒定胎兒患病的風(fēng)險(xiǎn)，故不建議采用本試劑對(duì)無(wú)癥狀的母體感染進(jìn)行篩查，不得將本試劑的檢測(cè)結(jié)果單獨(dú)作為終止妊娠的依據(jù)。

（6）免疫功能受損或接受免疫抑制治療的患者，如人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）感染患者或器官移植后接受免疫抑制治療的患者，其血清學(xué)IgM抗體檢測(cè)的參考價(jià)值有限，可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的醫(yī)學(xué)解釋。

（7）在近幾個(gè)月內(nèi)接受過(guò)輸血或其他血液制品治療的人群，對(duì)其陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果的分析應(yīng)慎重。

（8）病原體特異性IgM抗體不僅出現(xiàn)于初次感染，當(dāng)二次感染和復(fù)發(fā)感染時(shí)也可能出現(xiàn)。

（9）當(dāng)疾病的流行程度降低時(shí)陽(yáng)性預(yù)測(cè)值降低，對(duì)低危人群陽(yáng)性結(jié)果的解釋?xiě)?yīng)當(dāng)謹(jǐn)慎。建議對(duì)申報(bào)試劑臨床研究中的病例人群特征進(jìn)行說(shuō)明，并對(duì)適用人群的性別、年齡、地域等特征進(jìn)行明示。

8.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】 詳述以下性能指標(biāo)：

（1）對(duì)相應(yīng)國(guó)家參考品（如有）檢測(cè)的符合情況。

（2）最低檢測(cè)限（分析靈敏度）：說(shuō)明試劑的最低檢測(cè)濃度或滴度，簡(jiǎn)單介紹最低檢測(cè)限的確定方法。

（3）企業(yè)內(nèi)部陽(yáng)性/陰性參考品符合率，簡(jiǎn)單介紹陽(yáng)性參考品的來(lái)源、濃度梯度、陰性參考品組成、來(lái)源以及濃度梯度設(shè)置等信息。

（4）精密度：精密度參考品的組分、濃度及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。

（5）分析特異性

①交叉反應(yīng)：對(duì)易產(chǎn)生交叉反應(yīng)的其他病原體的高水平IgM抗體、特異性IgG抗體等的驗(yàn)證情況。

②干擾物質(zhì)：樣本中常見(jiàn)干擾物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，如溶血、高脂、黃疸等干擾因子研究（結(jié)果應(yīng)量化表示，禁用輕度、嚴(yán)重等模糊表述），有關(guān)高濃度總IgM和IgG抗體、自身抗體、類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）、嗜異型性抗體等的干擾驗(yàn)證。

③藥物影響：較常見(jiàn)的用于病原體感染治療的外用或內(nèi)服藥物對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。

（6）鉤狀（HOOK）效應(yīng)：對(duì)高濃度特異性IgM抗體的鉤狀效應(yīng)驗(yàn)證情況。

（7）對(duì)比試驗(yàn)研究（如有）：簡(jiǎn)要介紹參比試劑（方法）的信息、所采用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法及統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。

9.【注意事項(xiàng)】應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

（1）有關(guān)試劑盒內(nèi)人源組分（如有）生物安全性的警告。

（2）有關(guān)實(shí)驗(yàn)操作、樣本保存及處理等其他注意事項(xiàng)。

（三）擬定產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)及編制說(shuō)明

擬定產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合國(guó)食藥監(jiān)械〔2007〕229號(hào)和國(guó)食藥監(jiān)械〔2007〕609號(hào)文件的相關(guān)規(guī)定。另外，對(duì)于國(guó)產(chǎn)試劑，應(yīng)參考《中國(guó)生物制品規(guī)程》（2000年版），將擬申報(bào)產(chǎn)品的主要原材料、生產(chǎn)工藝及半成品檢定等內(nèi)容作為附錄附于標(biāo)準(zhǔn)正文后，并在正文的“產(chǎn)品分類(lèi)”項(xiàng)中引出該附錄內(nèi)容。

病原體特異性IgM抗體檢測(cè)試劑的注冊(cè)檢測(cè)應(yīng)主要包括以下性能指標(biāo)：物理性狀、陽(yáng)性參考品符合率、陰性參考品符合率、精密度、最低檢測(cè)限（分析靈敏度）等。陽(yáng)性參考品主要考察對(duì)不同滴度情況下的檢測(cè)符合性。陰性參考品則是對(duì)分析特異性（交叉反應(yīng)）的驗(yàn)證，應(yīng)主要包括易發(fā)生交叉反應(yīng)的其他病原體特異性IgM抗體的假陽(yáng)性情況的考核。

如果擬申報(bào)試劑已有相應(yīng)的國(guó)家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，則企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求不得低于上述標(biāo)準(zhǔn)要求。

（四）注冊(cè)檢測(cè)

根據(jù)國(guó)食藥監(jiān)械〔2007〕229號(hào)文件要求，首次申請(qǐng)注冊(cè)的第三類(lèi)產(chǎn)品應(yīng)該在國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)可的、具有相應(yīng)承檢范圍的醫(yī)療器械檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行連續(xù)三個(gè)生產(chǎn)批次樣品的注冊(cè)檢測(cè)。對(duì)于已經(jīng)有國(guó)家參考品的病原體特異性IgM抗體項(xiàng)目，在注冊(cè)檢測(cè)時(shí)應(yīng)采用相應(yīng)的國(guó)家參考品進(jìn)行，對(duì)于目前尚無(wú)國(guó)家參考品的項(xiàng)目，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)自行建立穩(wěn)定的質(zhì)控體系并提供相應(yīng)的內(nèi)部參考品。

（五）主要原材料研究資料

1.試劑盒所用病原體抗原的制備、篩選、純化以及鑒定等詳細(xì)試驗(yàn)資料，主要包括以下兩方面：

（1）企業(yè)自制抗原

如為天然抗原，則應(yīng)對(duì)病原體毒株選擇、病原體培養(yǎng)、抗原提取及純化、鑒定等實(shí)驗(yàn)過(guò)程予以詳述;如為重組抗原，則應(yīng)提交有關(guān)特定基因選擇、基因序列、基因克隆、抗原表達(dá)及抗原純化鑒定等詳細(xì)內(nèi)容，并對(duì)基因克隆的整個(gè)過(guò)程進(jìn)行詳述，如特定脫氧核糖核酸（DNA）分子的體外處理、重組連接、導(dǎo)入宿主細(xì)胞、宿主細(xì)胞繁殖以及重組子表達(dá)等實(shí)驗(yàn)過(guò)程。

（2）企業(yè)外購(gòu)抗原，則應(yīng)詳述抗原的名稱(chēng)及生物學(xué)來(lái)源，外購(gòu)方名稱(chēng)，提交外購(gòu)方出具的抗原性能指標(biāo)及檢驗(yàn)證書(shū)，詳述申請(qǐng)人對(duì)該抗原技術(shù)指標(biāo)的要求以及申請(qǐng)人確定該抗原作為主要原材料的依據(jù)。供貨商應(yīng)相對(duì)固定，不得隨意更換。

2.試劑盒所用抗體（如抗IgM-μ鏈抗體）的制備、篩選、純化以及鑒定等詳細(xì)試驗(yàn)資料，主要包括以下兩方面：

（1）企業(yè)自制抗體

如使用天然抗原作為免疫原則應(yīng)明確該天然抗原的來(lái)源;如使用重組抗原或其他人工合成抗原作為免疫原，應(yīng)提供相應(yīng)的核酸組分及重組抗原的序列信息。申請(qǐng)人對(duì)所選抗體的技術(shù)指標(biāo)要求（如外觀(guān)、純度、蛋白濃度、效價(jià)等），確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)。

（2）企業(yè)外購(gòu)抗體，應(yīng)詳述抗體的名稱(chēng)及生物學(xué)來(lái)源，外購(gòu)方名稱(chēng)，提交外購(gòu)方出具的抗體性能指標(biāo)及檢驗(yàn)證書(shū)，詳述申請(qǐng)人對(duì)該抗抗體技術(shù)指標(biāo)的要求以及申請(qǐng)人確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)。供貨商應(yīng)相對(duì)固定，不得隨意更換。

申請(qǐng)人應(yīng)對(duì)主要生物原料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)要求如外觀(guān)、純度、蛋白濃度、效價(jià)等進(jìn)行確認(rèn)，并對(duì)制備完成的抗原成品進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)以確認(rèn)其符合標(biāo)準(zhǔn)要求，整個(gè)生產(chǎn)工藝穩(wěn)定可靠。

3.其他主要原輔料的選擇及驗(yàn)證資料，如固相載體、硝酸纖維素膜、反應(yīng)緩沖液等，該類(lèi)原輔料一般均為外購(gòu)，應(yīng)詳述每一原輔料的外購(gòu)方名稱(chēng)，提交外購(gòu)方出具的每一原輔料性能指標(biāo)及檢驗(yàn)證書(shū)，詳述申請(qǐng)人對(duì)每一原輔料技術(shù)指標(biāo)的要求以及申請(qǐng)人確定該原輔料作為主要原輔料的依據(jù)。

4.企業(yè)內(nèi)部參考品的原料選擇、制備、定值、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析及相關(guān)的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證資料。應(yīng)提供對(duì)參考品性質(zhì)確認(rèn)的其他方法或試劑（建議采用國(guó)內(nèi)已上市的、臨床上普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類(lèi)試劑）的相關(guān)信息。

（六）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料

1.主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡(jiǎn)要說(shuō)明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。

2.產(chǎn)品基本反應(yīng)原理介紹。

3.包被工藝研究，申請(qǐng)人應(yīng)考慮如包被液量、濃度、時(shí)間等指標(biāo)對(duì)產(chǎn)品性能的影響，通過(guò)試驗(yàn)確定上述指標(biāo)的最佳組合。

4.顯色（發(fā)光）系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹。

5.實(shí)驗(yàn)體系反應(yīng)條件確定：申請(qǐng)人應(yīng)考慮反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)溫度、洗滌次數(shù)等條件對(duì)產(chǎn)品性能的影響，通過(guò)試驗(yàn)確定上述條件的最佳組合。

6. 酶催化底物（發(fā)光或變色）的最適條件研究。

7.體系中樣品加樣方式及加樣量確定：申請(qǐng)人應(yīng)考慮樣品加樣方式、加樣量對(duì)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果的影響，通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測(cè)，申請(qǐng)人還應(yīng)對(duì)可用于樣本稀釋的基質(zhì)或處理方法進(jìn)行研究，通過(guò)試驗(yàn)確定最終選擇的用于樣本稀釋的基質(zhì)或處理方法。

（七）分析性能評(píng)估資料

企業(yè)應(yīng)提交原廠(chǎng)在產(chǎn)品研制或成品驗(yàn)證階段對(duì)試劑盒進(jìn)行的所有性能驗(yàn)證的研究資料，包括具體研究方法、內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)、試驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)分析等詳細(xì)資料。對(duì)于病原體特異性IgM抗體檢測(cè)試劑，建議著重對(duì)以下分析性能進(jìn)行研究。

1.最低檢測(cè)限（分析靈敏度）

選取特定滴度的病原體特異性IgM抗體樣本，做系列倍比稀釋?zhuān)瑢z測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率在90%～95%（n≥20）的最大稀釋倍數(shù)作為試劑盒的最低檢測(cè)限。

2.分析特異性

（1）交叉反應(yīng)

用于病原體特異性IgM抗體檢測(cè)試劑交叉反應(yīng)驗(yàn)證主要考慮以下幾方面可能性：

①對(duì)抗原結(jié)構(gòu)相近或臨床癥狀相似的其他病原體高水平IgM抗體血清進(jìn)行交叉反應(yīng)研究，如乙型肝炎病毒核心抗體（HBc）IgM、甲型肝炎病毒（HAV）IgM、弓形蟲(chóng)、風(fēng)疹病毒、單純皰疹病毒以及巨細(xì)胞病毒IgM抗體等。

②高濃度病原體特異性IgG抗體與特異性IgM抗體的交叉反應(yīng)驗(yàn)證。

申請(qǐng)人應(yīng)提交所有用于交叉反應(yīng)驗(yàn)證的病原體來(lái)源、濃度或滴度確認(rèn)等信息。建議申請(qǐng)人將有關(guān)交叉反應(yīng)驗(yàn)證的信息以列表的方式在產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的【產(chǎn)品性能指標(biāo)】項(xiàng)中列出。

（2）干擾物質(zhì)

①內(nèi)源性干擾

對(duì)樣本中常見(jiàn)的內(nèi)源性干擾物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，如溶血、高脂、黃疸、類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）、抗核抗體（ANA）、抗線(xiàn)粒體抗體（AMA）、高濃度非特異性IgG和IgM抗體（血清總IgG和IgM）等。方法為對(duì)病原體特異性IgM抗體陰性、弱陽(yáng)性（臨界濃度）的臨床或模擬添加樣本分別進(jìn)行驗(yàn)證，樣本量選擇應(yīng)體現(xiàn)一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明樣本的制備方法及干擾實(shí)驗(yàn)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，確定可接受的干擾物質(zhì)極限濃度。

②抗凝劑的干擾

如果試劑盒適用樣本類(lèi)型包括血漿樣本，應(yīng)采用各種適用抗凝劑抗凝的血漿樣本分別與血清樣本進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)研究。方法為對(duì)不少于50例源自同一患者的病原體特異性IgM抗體陰性、弱陽(yáng)性（略高于臨界值）的血清和血漿樣本（不同抗凝劑各50例）進(jìn)行檢測(cè)以驗(yàn)證申報(bào)試劑對(duì)于血清和血漿樣本的檢測(cè)結(jié)果的一致性。

③目前，病原體特異性IgM抗體檢測(cè)試劑通常采用捕獲法（又稱(chēng)雙夾心法）和間接法兩種原理。后者是將病原體抗原包被在固相載體上，加入含待測(cè)IgM抗體的樣本后，待抗原抗體結(jié)合后，再加入酶標(biāo)記的抗IgM抗體進(jìn)行反應(yīng)，孵育后洗去未結(jié)合的酶結(jié)合物再加入酶底物顯色以反應(yīng)“抗原-抗體-酶標(biāo)二抗”復(fù)合物的存在。該方法在檢測(cè)特異性IgM抗體時(shí)存在一定不足，由于血清中存在的IgM類(lèi)類(lèi)風(fēng)濕因子能與IgG抗體結(jié)合，然后結(jié)合到酶標(biāo)二抗上，易造成假陽(yáng)性，高效價(jià)的病原體特異性IgG抗體也可與IgM抗體競(jìng)爭(zhēng)抗原結(jié)合位點(diǎn)而導(dǎo)致假陰性。因此，采用間接法（固相包被病原體抗原）的試劑，需要在病原體特異性IgM檢測(cè)前采用一定的方法去除樣本中的IgG類(lèi)抗體，例如，在樣本緩沖液中加入抗人IgG抗體，可以特異性地結(jié)合血清或血漿中的IgG并沉淀，如果樣本中存在類(lèi)風(fēng)濕因子，也將被抗人IgG-IgG的復(fù)合物所吸附而去除干擾。

基于上述理論，使用間接法原理的試劑盒，在樣本處理環(huán)節(jié)應(yīng)該設(shè)置一定的IgG消除體系以降低實(shí)驗(yàn)中假陽(yáng)性或假陰性的可能性。如果反應(yīng)體系中使用了相關(guān)的IgG吸附技術(shù)（IgG吸附劑）來(lái)去除類(lèi)風(fēng)濕因子、抗核抗體或病原體特異性IgG抗體的干擾，應(yīng)以mg/dL為單位注明IgG吸附劑對(duì)樣本中人IgG抗體的吸附能力，并進(jìn)行以下的實(shí)驗(yàn)研究：對(duì)至少10份臨界值附近的病原體特異性IgM抗體弱陽(yáng)性并含有多水平病原體特異性IgG抗體的樣本進(jìn)行檢測(cè)，比較去除總IgG前后的結(jié)果，驗(yàn)證IgG吸附劑消除干擾的效果，以上實(shí)驗(yàn)可以采用人工制備的樣本進(jìn)行。

④對(duì)至少10份含有病原體特異性IgM抗體的樣本進(jìn)行IgM破壞實(shí)驗(yàn)研究，方法為采用特定的化學(xué)制劑（如2-巰基乙醇或二硫蘇糖醇）處理樣本后，重新進(jìn)行檢測(cè)，IgM檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陰性。

5.精密度

企業(yè)應(yīng)對(duì)每項(xiàng)精密度指標(biāo)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)的范圍等，針對(duì)本類(lèi)產(chǎn)品的精密度評(píng)價(jià)主要包括以下要求。

（1）對(duì)可能影響檢測(cè)精密度的主要變量進(jìn)行驗(yàn)證，除申報(bào)試劑本身外，還應(yīng)對(duì)操作者、實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)等要素進(jìn)行相關(guān)的驗(yàn)證。

（2）設(shè)定合理的精密度評(píng)價(jià)周期，如有條件，建議申請(qǐng)人選擇不同的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)以對(duì)室間精密度進(jìn)行評(píng)價(jià)。

（3）用于精密度評(píng)價(jià)的質(zhì)控品應(yīng)至少包括三個(gè)水平:

①陰性質(zhì)控品：待測(cè)物濃度低于試劑盒的臨界值（cut-off value）或背景值較高的零濃度質(zhì)控品，陰性檢出率應(yīng)為100%（n≥20）。

②弱陽(yáng)性質(zhì)控品：待測(cè)物濃度略高于試劑盒的臨界值（cut-off value），陽(yáng)性檢出率應(yīng)在90%～95%范圍（n≥20）。

③陽(yáng)性質(zhì)控品：待測(cè)物濃度呈中到強(qiáng)陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率為100%，且CV≤15%（n≥20）。

另外，建議選擇適量臨床采集的新鮮病人樣本（包括所有樣本類(lèi)型）作為無(wú)靶值質(zhì)控品進(jìn)行精密度評(píng)價(jià)，以更好地模仿臨床檢測(cè)環(huán)境。

6.陽(yáng)性/陰性參考品

如申報(bào)產(chǎn)品有相應(yīng)的國(guó)家參考品，則企業(yè)內(nèi)部陽(yáng)性/陰性參考品應(yīng)參考國(guó)家參考品的項(xiàng)目設(shè)置。在不低于國(guó)家參考品要求的前提下，申請(qǐng)人可以結(jié)合實(shí)際情況設(shè)置合理的內(nèi)部陽(yáng)性/陰性參考品。對(duì)于沒(méi)有國(guó)家參考品的產(chǎn)品，申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品性能驗(yàn)證的實(shí)際情況自行設(shè)定企業(yè)內(nèi)部參考品，陽(yáng)性參考品應(yīng)著重考慮抗體滴度要求，陰性參考品則主要涉及對(duì)分析特異性（交叉反應(yīng)）的驗(yàn)證情況。

申請(qǐng)人應(yīng)對(duì)內(nèi)部陽(yáng)性/陰性參考品的來(lái)源、抗體滴度等信息進(jìn)行精確的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，并提交詳細(xì)的驗(yàn)證資料。

7.鉤狀（HOOK）效應(yīng)

須采用高滴度的病原體特異性IgM抗體的血清進(jìn)行梯度稀釋后由低濃度至高濃度開(kāi)始檢測(cè)，每個(gè)梯度的稀釋液重復(fù)3～5份，對(duì)鉤狀效應(yīng)進(jìn)行合理的驗(yàn)證。建議在產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)上明示對(duì)鉤狀效應(yīng)的研究結(jié)果。

（八）參考值（范圍）確定資料

重點(diǎn)提交對(duì)申報(bào)試劑陰性/灰區(qū)/陽(yáng)性等結(jié)果判斷的臨界值確定的實(shí)驗(yàn)研究資料，應(yīng)包括具體的試驗(yàn)方案、評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析、研究數(shù)據(jù)等研究資料。建議采用受試者工作特征曲線(xiàn)（ROC）的分析方式來(lái)選擇確定合理的臨界值，如實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析存在灰區(qū)（equivocal zone），則應(yīng)明確灰區(qū)建立的基礎(chǔ)。臨界值建立的樣本來(lái)源選擇應(yīng)考慮到地域性、年齡、不同生理狀態(tài)等因素的影響，并明確臨界值在不同的樣本類(lèi)型是否有差異。對(duì)臨界值建立后所產(chǎn)生的臨床靈敏度和特異性進(jìn)行充分判斷，使產(chǎn)生假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果的可能性均降至最低。

（九）穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報(bào)試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。前者主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、高溫加速破壞穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性及開(kāi)瓶穩(wěn)定性（如涉及）等研究，申請(qǐng)人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對(duì)于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

考慮到低溫條件下長(zhǎng)時(shí)間保存可能造成病原體特異性IgM抗體的活性減弱，申請(qǐng)人應(yīng)對(duì)樣本穩(wěn)定性進(jìn)行合理的驗(yàn)證，主要是對(duì)冷藏和冷凍兩種條件下的有效期進(jìn)行驗(yàn)證，以確認(rèn)不同類(lèi)型樣本的短期、長(zhǎng)期保存條件及效期。需要冷凍保存的樣本應(yīng)對(duì)凍融次數(shù)（重要指標(biāo)）進(jìn)行合理的驗(yàn)證。某些用于防腐、冷凍用途或起穩(wěn)定保護(hù)作用的添加劑（如疊氮化物）可能會(huì)對(duì)IgM抗體的檢測(cè)造成影響，如涉及，請(qǐng)對(duì)該添加劑的影響進(jìn)行合理驗(yàn)證。

另外，如果要用于加熱樣本（如熱滅活）的檢測(cè)，則應(yīng)對(duì)加熱前后的病原體特異性IgM抗體陽(yáng)性及陰性樣本進(jìn)行加熱因素的干擾驗(yàn)證。方法為對(duì)臨界值附近的至少10份弱陽(yáng)性加熱和未加熱樣本進(jìn)行對(duì)比檢測(cè)，比較檢測(cè)結(jié)果的差異;對(duì)至少10份陰性加熱和未加熱的樣本進(jìn)行對(duì)比檢測(cè)，比較檢測(cè)結(jié)果的差異。

試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性?xún)刹糠謨?nèi)容的研究結(jié)果均應(yīng)在說(shuō)明書(shū)【儲(chǔ)存條件及有效期】和【樣本要求】?jī)身?xiàng)中進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。

（十）臨床試驗(yàn)資料

1. 研究方法

（1）對(duì)于已有同類(lèi)產(chǎn)品上市的試劑臨床研究，選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類(lèi)產(chǎn)品作為參比試劑，采用擬申報(bào)產(chǎn)品（以下稱(chēng)考核試劑）與之進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究，證明本品與已上市產(chǎn)品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品?？紤]到試劑盒的預(yù)期用途，陽(yáng)性樣本中應(yīng)包括一定量的新鮮樣本比例。

另外，申請(qǐng)人還應(yīng)選擇不少于30例、感染急性期患者采集的樣本進(jìn)行考核試劑與病原體分離培養(yǎng)鑒定方法的比較研究，以確定申報(bào)試劑檢測(cè)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)方法比較的符合率并以此判斷其臨床靈敏度和特異性。如果病原體分離培養(yǎng)鑒定的方法不可行也可以采用其他用于感染急性期判斷的方法進(jìn)行比對(duì)研究，例如：病原體IgG抗體的血清學(xué)轉(zhuǎn)換（動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)2份或以上的血清IgG，恢復(fù)期與急性期比較IgG呈4倍以上升高）、病原體核酸檢測(cè)或直接抗原檢測(cè)等方法，對(duì)于病原體感染急性期的判斷應(yīng)密切結(jié)合患者的臨床診斷綜合進(jìn)行。

（2）對(duì)于無(wú)同類(lèi)產(chǎn)品上市的申報(bào)試劑的臨床研究，則必須選擇病原體感染檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)方法并結(jié)合臨床診斷進(jìn)行相應(yīng)的對(duì)比試驗(yàn)研究，如病原體分離培養(yǎng)鑒定、病原體IgG抗體的血清學(xué)轉(zhuǎn)換、病原體核酸檢測(cè)或直接抗原檢測(cè)等方法。

2.臨床研究單位的選擇

申請(qǐng)人在國(guó)內(nèi)不同區(qū)域選擇臨床單位，盡量使各單位的臨床樣本有一定的區(qū)域代表性;臨床研究單位應(yīng)具有特定病原體感染疾患診療、病原體分離培養(yǎng)鑒定方法或分子生物學(xué)方法檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)，實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)有足夠的時(shí)間熟悉檢測(cè)系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（儀器、試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉評(píng)價(jià)方案。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，考核試劑和參比方法都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。

3.臨床試驗(yàn)方案

臨床試驗(yàn)實(shí)施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床研究方案。各臨床研究機(jī)構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)基本一致，且保證在整個(gè)臨床試驗(yàn)過(guò)程中遵循預(yù)定的方案實(shí)施，不可隨意改動(dòng)。整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在臨床研究機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)并由本實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員操作完成，申報(bào)單位的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過(guò)程。

試驗(yàn)方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說(shuō)明原因。在試驗(yàn)操作過(guò)程中和判定試驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)采用盲法以保證試驗(yàn)結(jié)果的客觀(guān)性。各研究單位選用的參比試劑應(yīng)保持一致，以便進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。另外，考核試劑的樣本類(lèi)型不應(yīng)超越參比試劑對(duì)樣本類(lèi)型的檢測(cè)要求，如果選擇了參比試劑適用樣本類(lèi)型以外的樣本，則應(yīng)采用病原體分離培養(yǎng)鑒定或其他合理方法對(duì)額外的樣本類(lèi)型進(jìn)行驗(yàn)證。

4.病例選擇及樣本類(lèi)型

臨床試驗(yàn)應(yīng)選擇具有特定病原體感染癥狀/體征、相似癥狀或有密切接觸史等人群作為研究對(duì)象。企業(yè)在建立病例納入標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)考慮到不同人群的差異，盡量覆蓋各類(lèi)適用人群。在進(jìn)行結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析時(shí)，除總體病例數(shù)的要求外，建議對(duì)各類(lèi)人群分層進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析?？紤]到大樣本統(tǒng)計(jì)學(xué)的要求，臨床研究中病原體特異性IgM抗體的陽(yáng)性樣本例數(shù)以不少于120例為宜。對(duì)于陰性病例的選擇，也應(yīng)考慮到交叉反應(yīng)的需要，對(duì)靶病原體之外的其他病原體感染急性期的患者樣本進(jìn)行檢測(cè)，以從臨床角度考察其分析特異性。

5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對(duì)臨床試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法，如檢測(cè)結(jié)果一致性分析、受試者工作特征（ROC）曲線(xiàn)分析、陰性/陽(yáng)性符合率等。對(duì)于本類(lèi)產(chǎn)品對(duì)比實(shí)驗(yàn)的等效性研究，常選擇交叉四格表的形式總結(jié)兩種試劑的定性檢測(cè)結(jié)果，對(duì)定性結(jié)果進(jìn)行四格表卡方或kappa檢驗(yàn)以驗(yàn)證兩種試劑定性結(jié)果的一致性，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)可以證明兩種方法的檢測(cè)結(jié)果無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在臨床研究方案中應(yīng)明確統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)假設(shè)，即評(píng)價(jià)考核試劑與參比試劑是否等效的標(biāo)準(zhǔn)。

6.結(jié)果差異樣本的驗(yàn)證

在數(shù)據(jù)收集過(guò)程中，對(duì)兩種試劑檢測(cè)結(jié)果明顯不一致的樣本，應(yīng)采用“金標(biāo)準(zhǔn)”方法或臨床上普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的第三種同類(lèi)試劑（國(guó)內(nèi)已上市）進(jìn)行復(fù)核，同時(shí)結(jié)合患者的臨床病情對(duì)差異原因及可能結(jié)果進(jìn)行分析。如果申報(bào)試劑與參比試劑的檢測(cè)結(jié)果顯示不一致樣本均是位于二者的臨界值附近且例數(shù)很少（如低于總例數(shù)的1%），則對(duì)不一致原因作簡(jiǎn)要分析即可，不須進(jìn)行第三方復(fù)核。注意，如果有必要選擇第三方試劑復(fù)核，建議先采用第三方試劑對(duì)一定數(shù)量的申報(bào)試劑和參比試劑檢測(cè)結(jié)果一致的樣本（包括陽(yáng)性和陰性結(jié)果）進(jìn)行檢測(cè)，以對(duì)第三方試劑選擇的合理性進(jìn)行評(píng)估。

7. 臨床試驗(yàn)總結(jié)報(bào)告撰寫(xiě)

根據(jù)《體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則》（國(guó)食藥監(jiān)械〔2007〕240號(hào)）的要求，臨床試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)該對(duì)試驗(yàn)的整體設(shè)計(jì)及各個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對(duì)整個(gè)臨床試驗(yàn)實(shí)施過(guò)程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)分析方法。建議在臨床總結(jié)報(bào)告中對(duì)以下內(nèi)容進(jìn)行詳述。

（1）臨床試驗(yàn)總體設(shè)計(jì)及方案描述

①臨床試驗(yàn)的整體管理情況、臨床研究單位選擇、臨床主要研究人員簡(jiǎn)介等基本情況介紹。

②病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)、不同人群的預(yù)期選擇例數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)。

③樣本類(lèi)型，樣本的收集、處理及保存等。

④統(tǒng)計(jì)學(xué)方法、統(tǒng)計(jì)軟件、評(píng)價(jià)統(tǒng)計(jì)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)。

（2）具體的臨床試驗(yàn)情況

①申報(bào)試劑和參比試劑的名稱(chēng)、批號(hào)、有效期等信息。

②對(duì)各研究單位的病例數(shù)、人群分布情況進(jìn)行綜合，建議以列表或圖示方式給出具體例數(shù)及百分比。

③質(zhì)量控制，試驗(yàn)人員培訓(xùn)、質(zhì)控品檢測(cè)情況，對(duì)檢測(cè)精密度、質(zhì)控品測(cè)量值的抽查結(jié)果評(píng)估。

④具體試驗(yàn)過(guò)程，樣本檢測(cè)、數(shù)據(jù)收集、樣本長(zhǎng)期保存、結(jié)果不一致樣本的校驗(yàn)等。

（3）統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

①數(shù)據(jù)預(yù)處理、差異數(shù)據(jù)的重新檢測(cè)或第三方驗(yàn)證以及是否納入最終數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)、對(duì)異常值或缺失值的處理、研究過(guò)程中是否涉及對(duì)方案的修改。

②定性結(jié)果的一致性分析

陽(yáng)性符合率、陰性符合率、總體符合率及其95%（或99%）的置信區(qū)間。以交叉表的形式總結(jié)兩種試劑的定性檢測(cè)結(jié)果，對(duì)定性結(jié)果進(jìn)行四格表卡方或kappa檢驗(yàn)以驗(yàn)證兩種試劑定性結(jié)果的一致性。另外考慮到對(duì)不同樣本類(lèi)型以及不同人群的檢測(cè)結(jié)果可能存在一定差異，故建議對(duì)不同樣本類(lèi)型及不同人群分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析， 以對(duì)考核試劑的臨床性能進(jìn)行綜合分析。

（4）討論和結(jié)論

對(duì)總體結(jié)果進(jìn)行總結(jié)性描述并簡(jiǎn)要分析試驗(yàn)結(jié)果，對(duì)本次臨床研究有無(wú)特別說(shuō)明，最后得出臨床試驗(yàn)結(jié)論。

四、名詞解釋

1.分析特異性（analytical Specificity）：測(cè)量程序只測(cè)量被測(cè)量物的能力。分析特異性用于描述檢測(cè)程序在樣本中有其他物質(zhì)存在時(shí)只測(cè)量被測(cè)量物的能力。通常以一個(gè)被評(píng)估的潛在干擾物清單來(lái)描述，并給出在特定醫(yī)學(xué)相關(guān)濃度值水平的分析干擾程度。

注：潛在干擾物包括干擾物和交叉反應(yīng)物。

2.精密度（precision）：在規(guī)定條件下，相互獨(dú)立的測(cè)試結(jié)果之間的一致程度。精密度的程度是用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法得到的測(cè)量不精密度的數(shù)字形式表示，如標(biāo)準(zhǔn)差（SD）和變異系數(shù)（CV）。

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